Hur DNA-skador och senescenta celler formar åldrandets vetenskap

Vetenskapen om åldrande är studiet av 15 distinkta biologiska kännetecken som styr hur människokroppen förändras över tid. Dessa sammanlänkade mekanismer omfattar DNA-skador, förkortade telomerer, obalanser i tarmmikrobiomet och brister i den cellulära återvinningen. Dessutom hjälper vetenskapen om åldrande till att förklara hur livsstilsinterventioner kan rikta in sig på dessa biologiska signalvägar. Denna guide översätter komplex livslängdsvetenskap till handfasta insikter för hälsointresserade personer som söker evidensbaserade sätt att förlänga healthspan. Att förstå dessa åldrandeprocesser erbjuder en möjlig vägkarta för att bromsa biologisk nedgång. Målinriktad nutrition, fysisk aktivitet, tekniker för stressreduktion och nya vetenskapliga interventioner kan bidra till att optimera en påverkbar biologisk process.

“Den som vill äta mycket måste äta litet, ty genom att äta mindre kommer han att leva längre och därmed kunna äta mer.”, Luigi Cornaro (1484 till 1566)

Historiska perspektiv på åldrande

Åldrande och att vända åldrandeprocessen har fascinerat människor genom historien. Ett av de första dokumenterade försöken att vända åldrandeprocessen kom från den venetianske adelsmannen Luigi Cornaro (1467-1566), som publicerade "The Art of Living Long" och beskrev en livsstil för att uppnå lång livslängd. I sin ungdom levde Cornaro ett utsvävande liv, vilket ledde till många hälsoproblem vid 35 års ålder. Genom att ändra sin livsstil levde han nästan 100 år.

Mohammad bin Yousuf al-Harawis första formella studie av åldrande publicerades av Ibn Sina Academy of Medieval Medicine Sciences 1582 i hans bok Ainul Hayat ("Livets källa"). Denna bok behandlade beteendemässiga faktorer och livsstilsfaktorer som påverkar åldrande, inklusive kost, miljö, boendeförhållanden och läkemedel som kan öka eller minska åldrandetakten.

Åldringsforskningens moderna historia

Den moderna åldringsforskningens historia utgör den vetenskapliga studien av åldrande, och fältet har accelererat dramatiskt under det senaste århundradet.

• 1908: Nobelpristagaren Elie Metchnikoff (1845-1916) upptäckte fagocytos, en avgörande del av immunsystemet, och myntade termen "gerontologi".
• 1915-1917: Thomas Osborne genomförde de första systematiska experimenten för att fastställa effekterna av matrestriktion på livslängden hos råttor.
• 1930-talet: Rudolph Schoenheimer upptäckte isotopmärkning av biomolekyler, vilket visade att alla beståndsdelar i en organism befinner sig i ett konstant tillstånd av kemisk förnyelse.
• 1956: Denham Harman presenterade den fria radikalteorin om åldrande, som föreslog att organismer åldras eftersom de ackumulerar oxidativ skada.
• 1962, 1974, 2001, 2009, 2012, 2015, 2016, 2017: Nobeluppmärksammade upptäckter omfattade DNA:s molekylära struktur, lysosomer, som senare visade sig vara avgörande för autofagi, viktiga regulatorer av cellcykeln, hur kromosomer skyddas av telomerer och enzymet telomeras, att mogna celler kan omprogrammeras till att bli pluripotenta, hur celler reparerar skadat DNA, autofagimekanismer och molekylära mekanismer som styr dygnsrytmen.
• 2019: David Sinclair populariserade vetenskapen om åldrande med sin bok Lifespan: Why We Age and Why We Don't Have To.

De ursprungliga nio kännetecknen för åldrande

De ursprungliga nio kännetecknen för åldrande syftar på ett ramverk från 2013 som publicerades av Carlos López-Otín och kollegor och som identifierade och kategoriserade åldrandets cellulära och molekylära kännetecken.(1) Artikeln föreslog nio kandidatkännetecken som bidrar till åldrandeprocessen och tillsammans bestämmer åldrandets fenotyp.

Ett kännetecken bör helst uppfylla tre kriterier:

1. Det bör visa sig under normalt åldrande.
2. Dess experimentella förvärring bör påskynda åldrandet.
3. Dess experimentella förbättring bör bromsa den normala åldrandeprocessen och öka den friska livslängden.

1. Genomisk instabilitet

Externa fysiska, kemiska och biologiska agens utmanar kontinuerligt DNA:s integritet och stabilitet, och interna hot, inklusive fel vid DNA-replikation, spontana hydrolytiska reaktioner och produktion av reaktiva syreföreningar, leder med tiden till en ansamling av genetisk skada genom hela livet.(2-3)

2. Telomerförkortning

Telomerer är särskilt känsliga för åldersrelaterad försämring. Telomerförkortning observeras vid normalt åldrande hos både människor och möss. Telomerer binds av ett multiproteinkomplex som kallas shelterin, vilket förhindrar att DNA-reparationsproteiner får tillgång till telomererna. Utan detta skulle telomerer repareras som DNA-brott, vilket leder till kromosomfusioner. DNA-skada i telomerer är anmärkningsvärt konstant och mycket effektiv för att inducera senescens.(4-7)

3. Epigenetiska förändringar

Många epigenetiska förändringar påverkar alla celler och vävnader genom hela livet, orsakade av kost, kemikalier, läkemedel, solljus, värme/kyla, motion etc. Epigenetiska förändringar omfattar förändringar i DNA-metyleringsmönster, posttranslationell modifiering av histoner och omformning av kromatin. Medlemmar av sirtuinfamiljen (NAD-beroende proteindeacetylaser och ADP-ribosyltransferaser) har studerats ingående som potentiella anti-aging-faktorer. Hos människor bidrar minst tre medlemmar av sirtuinfamiljen (SIRT1, SIRT3 och SIRT6) till hälsosamt åldrande.(8-10)

4. Förlust av proteostas

Proteostas omfattar mekanismer för att stabilisera korrekt veckade proteiner (särskilt proteiner i värmechockfamiljen) och mekanismer för nedbrytning av proteiner via proteasomen och lysosomen. Flera studier har visat att åldrande förändrar proteostas, vilket leder till kroniskt uttryck av ovikta, felveckade och aggregerade proteiner. Dessa bidrar till utvecklingen av vissa åldersrelaterade degenerativa sjukdomar, såsom Alzheimers sjukdom.(11-13)

Bild: Förlust av proteostas. Oförmåga att återveckla eller bryta ned ovikta proteiner kan leda till deras ansamling och aggregering, vilket resulterar i proteotoxiska effekter.
Källa: López-Otín, C. & Blasco, M. & Partridge, L. & Serrano, M. & Kroemer, G. (2013). The hallmarks of aging. Cell 153 (6): 1194–1217.

5. Dereglerad näringsavkänning

IGF-1- och insulinsignalering, känd som IIS-vägen, är den mest evolutionärt bevarade åldersreglerande signalvägen. Utöver IIS-vägen, som deltar i glukosavkänning, finns tre ytterligare relaterade och sammanlänkade system för näringsavkänning: mTOR (känner av höga aminosyrakoncentrationer), AMPK (känner av lågenergistatus genom att detektera höga AMP-nivåer) och sirtuiner (känner av lågenergistatus genom att detektera höga NAD+-nivåer). Det finns starka belägg för att anabol signalering (mTOR, högt insulin) påskyndar åldrande, medan minskad näringssignalering (AMPK, lågt insulin) förlänger livslängden.(14-16)

6. Mitokondriell dysfunktion

Mitokondriell dysfunktion har visat sig öka under åldrandeprocessen. När en organism åldras minskar effektiviteten i den cellulära andningskedjan, vilket leder till elektronläckage och minskad ATP-produktion. Den minskade effektiviteten i mitokondriell bioenergetik vid åldrande kan bero på flera överlappande mekanismer, inklusive minskad mitokondriell biogenes, ansamling av mutationer och deletioner i mtDNA, oxidativ stress mot mitokondriella proteiner, destabilisering av andningskedjan, förändringar i lipidkompositionen i mitokondriella membran och förändringar i mitokondriernas dynamik.(17-19)

7. Cellulär senescens

Eftersom antalet senescenta celler ökar med åldern, antas det att senescens bidrar till åldrande. Senescens behövs dock för att förhindra spridning och proliferation av skadade celler genom att utlösa ett immunsvar. Denna cellulära kontrollpunkt kräver ett effektivt system för cellersättning som omfattar både bortstädning av senescenta celler och mobilisering av progenitorceller för att återställa optimala cellantal.

Senescenta celler uppvisar betydande förändringar i sitt sekretom, som är särskilt rikt på proinflammatoriska cytokiner och matrixmetalloproteinaser. Detta benämns därför den senescensassocierade sekretoriska fenotypen (SASP).(20)

8. Stamcellsutarmning

Vuxna stamceller kan självförnya sig och differentiera till flera celltyper inom en vävnad. Även om fenotyper och mekanismer varierar kraftigt, minskar funktionen hos alla stamcellspopulationer med åldern. Stamcellsutarmning är en samlande konsekvens av olika åldersrelaterade skador och utgör sannolikt en av de yttersta orsakerna till cellulärt åldrande.(21)

Studier på gamla möss har visat en övergripande minskning av cellcykelaktiviteten hos hematopoetiska stamceller (HSCs), vilket korrelerar med ackumulering av DNA-skador och överuttryck av cellcykelhämmande proteiner (t.ex. p16INK4a). Telomerförkortning är också en betydande orsak till stamcellsnedgång under åldrandet.(22-24)

9. Förändrad intercellulär kommunikation

Cellulärt åldrande sker också på nivån för intercellulär kommunikation. Det omfattar neurohormonell signalering, ökade inflammatoriska reaktioner, immunövervakning av patogener och premaligna celler samt förändringar i den extracellulära miljön.

Åldrande på grund av inflammation kallas inflammaging. Det kan bero på flera orsaker, såsom ackumulering av proinflammatoriska vävnadsskador, att ett dysfunktionellt immunsystem inte effektivt lyckas eliminera patogener och dysfunktionella värdceller, eller ett bristfälligt autofagiskt svar.(25)

Åldersrelaterade förändringar i en vävnad kan leda till åldersspecifik försämring i närliggande vävnad. Senescenta celler kan inducera senescens i intilliggande celler via gap-junction-medierade cell-cell-kontakter och processer som involverar reaktiva syreföreningar. Detta fenomen kallas också senescent cell bystander effect.(26)

Förstyvning av den extracellulära matrisen: ett möjligt nytt kännetecken?

År 2021 publicerade forskarna Alexander Fedintsev och Alexey Moskalev en artikel som undersökte förstyvning av den extracellulära matrisen (ECM) och uppbyggnaden av korsbindningar mellan långlivade molekyler såsom kollagen och elastin. De föreslår att icke-enzymatiska kemiska reaktioner som glykering, karbamylation och karbonylering orsakar ECM-förstyvning. Detta skulle till och med kunna vara en bakomliggande orsak till flera vedertagna kännetecken på åldrande, såsom cellulär senescens.

Dessa förändringar leder till bildning av addukter och korsbindningar som i sin tur orsakar inflammation, fibros, störningar i vävnaders cirkadiska klocka, stamcellsåldrande, etc. Det har tidigare fastställts att avancerade glykeringsslutprodukter (AGEs) har patogen betydelse i olika vävnader och signalvägar i kroppen. Organismer med exceptionellt lång livslängd, såsom grönlandsvalar, har exceptionellt låg AGE-ackumulering.(27)

Att utöka från 9 till 12 kännetecken på åldrande

Att utöka från 9 till 12 kännetecken på åldrande syftar på 2023 års uppdatering av ramverket för åldrandets kännetecken, publicerad i Cell, där López-Otín och kollegor lade till 3 nya kännetecken: dysbios, kronisk inflammation och nedsatt makroautofagi.(28)

2023 års studie, "Hallmarks of aging: expanding universe," presenterar dessa tillägg som en utvidgning av den befintliga modellen, vilket för ramverket från 9 kännetecken till 12 kännetecken. I det sammanhanget identifieras dysbios, kronisk inflammation och nedsatt makroautofagi som nytillagda kännetecken i det uppdaterade ramverket.(28) De angivna publiceringsuppgifterna för källan är López-Otín, C. & Blasco, M. & Partridge, L. & Serrano, M. & Kroemer, G. (2023). Hallmarks of aging: An expanding universe. Cell 186 (2): P243–278.

Bild: Kännetecknen på åldrande.
Källa: López-Otín, C. & Blasco, M. & Partridge, L. & Serrano, M. & Kroemer, G. (2023). Hallmarks of aging: An expanding universe. Cell 186 (2): P243–278.

10. Dysbios

Dysbios är en obalans i tarmens mikrobiella sammansättning, vilket leder till kronisk inflammation och andra negativa hälsoeffekter. När vi åldras ökar individualiteten i våra tarmmikrobiom, ett fenomen som är kopplat till välkända mikrobiella metaboliter som är involverade i immunreglering, inflammation och åldrande.

Under senare år tenderar friska individer att följa en utveckling mot en distinkt mikrobiell sammansättning, medan personer med sämre hälsa uppvisar minskad eller utebliven förskjutning. Detta understryker tarmmikrobiotans avgörande roll i åldrandeprocessen och tyder på att modulering av mikrobiotan kan ha potential för att bibehålla hälsa och förebygga åldersrelaterade sjukdomar.(29)

11. Kronisk inflammation

Kronisk eller tyst inflammation är ett annat nyligen tillagt kännetecken på åldrande. Kronisk inflammation uppstår när immunförsvaret är konstant aktiverat, vilket leder till vävnadsskada och funktionsstörning. När vi åldras tenderar nivåerna av inflammatoriska cytokiner och blodbiomarkörer såsom CRP att stiga. Detta tyder på förekomsten av låggradig inflammation, vilket är ett kännetecken för åldrandeprocessen. Särskilt förhöjda nivåer av IL-6 i blodbanan fungerar som en prediktiv biomarkör för dödlighet av alla orsaker i åldrande mänskliga populationer.(30)

Detta understryker vikten av att övervaka inflammation som en kritisk faktor vid åldrande och dess associerade sjukdomar. Kronisk inflammation bidrar till många åldersrelaterade sjukdomar, inklusive Alzheimers, cancer och hjärt-kärlsjukdom.

12. Nedsatt makroautofagi

Nedsatt makroautofagi, eller helt enkelt autofagi, är det tredje nyligen tillagda kännetecknet på åldrande. Makroautofagi är en cellulär process som rensar bort skadade eller dysfunktionella organeller och proteiner. När makroautofagi är nedsatt ansamlas dessa skadade komponenter i celler, vilket leder till cellulär dysfunktion och sjukdom.

Autofagi bidrar till proteostas och påverkar icke-proteinhaltiga makromolekyler (t.ex. cytosoliskt DNA, lipider, glykogen) samt organeller såsom mitokondrier (som riktas mot genom mitofagi), lysosomer (lysofagi), endoplasmatiskt retikel (retikulofagi), peroxisomer (pexofagi) och invaderande patogener (xenofagi). En av de viktigaste orsakerna till minskad omsättning av organeller är nedgången i autofagi med åldern.(31)

Integrering av kännetecknen

I sin senaste studie menar López-Otín et al. att dessa tolv grundläggande markörer för åldrande är funktionellt sammanlänkade. Dessa markörer anger centrala determinanter som styr åldrandeprocessen och är sammanlänkade med åtta huvudsakliga egenskaper för välbefinnande. De senare avser en rad organisatoriska kännetecken som rumslig kompartementalisering, upprätthållande av homeostas över en längre tid och svar på störningar.

Dessutom är åldringsmarkörer förknippade med åtta föreslagna nivåer av organismisk organisation. De faktorer som nämnts ovan skapar tillsammans ett komplext multidimensionellt rum av interaktioner som belyser vissa grundläggande drag i åldrandeprocessen. Genom att förstå dessa sammanlänkningar och interaktioner kan forskare upptäcka nya insikter i åldrandets mekanism, vilket i sin tur kan leda till utvecklingen av mer effektiva strategier för att främja hälsosamt åldrande och förbättra livskvaliteten för äldre individer.

Bild: Integrering av kännetecknen.
Källa: López-Otín, C. & Blasco, M. & Partridge, L. & Serrano, M. & Kroemer, G. (2023). Hallmarks of aging: An expanding universe. Cell 186 (2): P243–278.

Att lägga till mer i mixen: 3 nyaste kännetecknen på åldrande

Allteftersom vetenskapen om åldrande och lång livslängd fortskrider kan det ibland vara svårt att hänga med i all den senaste forskningen, särskilt inom detta växande forskningsfält. Med det sagt finns det tre nya förslag att lägga till de 12 kännetecken för åldrande som presenterades tidigare:

13. Förändrade mekaniska egenskaper

Mekanobiologi utforskar idén att åldrande förändrar vävnaders mekaniska egenskaper. Den undersöker hur mekaniska krafter och förändringar i cellers och vävnaders mekaniska egenskaper bidrar till sjukdom och åldrande. Mekanoterapeutik, inklusive egenvårdsmetoder som stretching och rörlighetsövningar, kan hjälpa till att reparera vävnad.(32-33)

14. Cellulär förstoring

Cellförstoring (cellulär hypertrofi) är kopplad till åldrande och cellulär senescens. Forskning har visat att när celler åldras tenderar de att öka i storlek, och denna förändring kan påverka cellfunktionen. Celler fungerar dock bäst när de inte är förstorade. Att följa en näringsrik kost verkar vara mycket fördelaktigt för att effektivt motverka cellförstoring.(34-35)

15. Dysreglerad RNA-splitsning

Den dysreglering av RNA-splitsning som är ett kännetecken för åldrande rör transkriberingen av den genetiska koden till budbärar-RNA (mRNA) innan det översätts till proteiner. Med åldrandet kan precisionen i denna splitsningsprocess försämras, vilket leder till olika åldersrelaterade sjukdomar som cancer och typ 2-diabetes. Forskning har visat att Medelhavskosten har en positiv inverkan på problem relaterade till dysreglerad splitsning.(36-38)

Slutsats

Dessa 15 kännetecken utgör en ram för att förstå de komplexa biologiska processerna bakom åldrande. De är avgörande för att utveckla naturliga och medicinska insatser som kan bromsa och potentiellt vända aspekter av åldrandeprocessen.

🔬 Att förstå den sammanlänkade naturen hos dessa kännetecken är avgörande för att utveckla heltäckande strategier för hälsosamt åldrande. I takt med att forskningen fortsätter att utvecklas kommer vår förståelse för åldringsmekanismer att fördjupas, vilket potentiellt kan leda till genombrott som inte bara förlänger livslängden utan också healthspan—den period i livet som tillbringas vid god hälsa.

Vetenskapliga referenser:

1. López-Otín, C. & Blasco, M. & Partridge, L. & Serrano, M. & Kroemer, G. (2013). The hallmarks of aging. Cell 153 (6): 1194–1217.
2. Moskalev, A. et al. (2013). The role of DNA damage and repair in aging through the prism of Koch-like criteria. Ageing Research Reviews 12 (2): 661–684.
   
3. Hoeijmakers, J.(2009). DNA damage, aging, and cancer. New England Journal of Medicine 361 (15): 1475–1485.
4. Blackburn, E. &, Greider, C. & Szostak, J. (2006). Telomeres and telomerase: The path from maize, Tetrahymena and yeast to human cancer and aging. Nature Medicine 12 (10): 1133–1138.
5. Blasco, M. (2007). Telomere length, stem cells and aging. Nature Chemical Biology 3 (10): 640–649.
6. Palm, W, & de Lange, T. (2008). How shelterin protects mammalian telomeres. Annual Review of Genetics 42: 301–334.
7. Fumagalli, M. et al. (2012). Telomeric DNA damage is irreparable and causes persistent DNA-damage-response activation. Nature Cell Biology 14 (4): 355–365.
8. Talens, R. et al. (2012). Epigenetic variation during the adult lifespan: Cross‐sectional and longitudinal data on monozygotic twin pairs. Aging Cell 11 (4): 694–703.
9. Fraga, M. & Esteller, M. (2007). Epigenetics and aging: The targets and the marks. Trends in Genetics 23 (8): 413–418.
10. Guarente, L. (2011). Sirtuins, aging, and metabolism. Cold Spring Harbor Symposia On Quantitative Biology 76: 81–90. New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press.
11. Hartl, F. & Bracher, A. & Hayer-Hartl, M. (2011). Molecular chaperones in protein folding and proteostasis. Nature 475 (7356): 324–332.
12. Koga, H. & Kaushik, S. & Cuervo, A. (2011). Protein homeostasis and aging: The importance of exquisite quality control. Ageing Research Reviews 10 (2): 205–215.
13. Powers, E. & Morimoto, R. & Dillin, A. & Kelly, J. & Balch, W. (2009). Biological and chemical approaches to diseases of proteostasis deficiency. Annual Review of Biochemistry 78: 959–991.
14. Barzilai, N. & Huffman, D. & Muzumdar, R. & Bartke, A. (2012). The critical role of metabolic pathways in aging. Diabetes 61 (6): 1315–1322.
15. Houtkooper, R. & Williams, R. & Auwerx, J. (2010). Metabolic networks of longevity. Cell 142 (1): 9–14.
16. Papadopoli, D. et al. (2019). mTOR as a central regulator of lifespan and aging. F1000Research 8: F1000 Faculty Rev-998.
17. Green, D. & Galluzzi, L. & Kroemer, G. (2011). Mitochondria and the autophagy–inflammation–cell death axis in organismal aging. Science 333 (6046): 1109–1112.
    
18. Sahin, E. & DePinho, R. (2012). Axis of ageing: telomeres, p53 and mitochondria. Nature reviews Molecular Cell Biology 13 (6): 397–404.
19. Wang, K. & Klionsky, D. (2011). Mitochondria removal by autophagy. Autophagy 7 (3): 297–300.
20. Kuilman, T. & Michaloglou, C. & Mooi, W. & Peeper, D. (2010). The essence of senescence. Genes & Development 24 (22): 2463–2479.
21. Schultz, M. & Sinclair, D. (2016). When stem cells grow old: Phenotypes and mechanisms of stem cell aging. Development 143 (1): 3–14.
22. Rossi, D. et al. (2007). Deficiencies in DNA damage repair limit the function of haematopoietic stem cells with age. Nature 447 (7145): 725–729.
23. Janzen, V. et al. (2006). Stem-cell ageing modified by the cyclin-dependent kinase inhibitor p16INK4a. Nature 443 (7110): 421–426.
24. Rossi, D. et al (2007). Deficiencies in DNA damage repair limit the function of haematopoietic stem cells with age. Nature 447 (7145): 725–729.
25. Salminen, A. & Kaarniranta, K. & Kauppinen, A. (2012). Inflammaging: Disturbed interplay between autophagy and inflammasomes. Aging 4 (3): 166.
26. Nelson, G. et al. (2012). A senescent cell bystander effect: Senescence-induced senescence. Aging Cell 11 (2): 345–349.
27. Fedintsev, A. & Moskalev, A. (2020). Stochastic non-enzymatic modification of long-lived macromolecules—a missing hallmark of aging. Ageing Research Reviews 62: 101097.
28. López-Otín, C. & Blasco, M. & Partridge, L. & Serrano, M. & Kroemer, G. (2023). Hallmarks of aging: An expanding universe. Cell 186 (2): P243–278.
29. Wilmanski, T. et al. (2021). Gut microbiome pattern reflects healthy ageing and predicts survival in humans. Nature Metabolism 3 (2): 274–286.
30. Hirata, T. et al. (2020). Associations of cardiovascular biomarkers and plasma albumin with exceptional survival to the highest ages. Nature communications 11 (1): 3820.
31. Levine, B. & Kroemer, G. (2019). Biological functions of autophagy genes: A disease perspective. Cell 176 (1-2): 11–42.
32. Phillip, J. & Aifuwa, I. & Walston, J. & Wirtz, D. (2015). The mechanobiology of aging. Annual Review of Biomedical Engineering 17: 113–141.
33. Tschumperlin, D. & Lagares, D. (2020). Mechano-therapeutics: Targeting mechanical signaling in fibrosis and tumor stroma. Pharmacology & Therapeutics 212: 107575.
34. Lengefeld, J. et al. (2021). Cell size is a determinant of stem cell potential during aging. Science Advances 7 (46): eabk0271.
35. Davies, D. & van den Handel, K. & Bharadwaj, S. & Lengefeld, J. (2022). Cellular enlargement—A new hallmark of aging? Frontiers in Cell and Developmental Biology 10: 1036602.
36. Angarola, B. & Anczuków, O. (2021). Splicing alterations in healthy aging and disease. Wiley Interdisciplinary Reviews: RNA 12 (4): e1643.
37. Stegeman, R., & Weake, V. (2017). Transcriptional signatures of aging. Journal of Molecular Biology 429 (16): 2427–2437.
38. del Río-Moreno, M. et al. (2020). Dietary intervention modulates the expression of splicing machinery in cardiovascular patients at high risk of type 2 diabetes development: Ffrom the CORDIOPREV study. Nutrients 12 (11): 3528.